Isolierung und Vermehrung von Stammzellen aus Nabelschnurblut
- Blutentnahme aus der Nabelschnurvene
Prozessablauf der Stammzellkultur
- Probeneingang im Stammzelllabor (Alle weiteren Arbeitsschritte erfolgen innerhalb der Sterilwerkbank.)
- Aus dem Probenmaterial wird zunächst Material für den Sterilitätstest entnommen
- verdünnte Nabelschnurblut-Aliquots werden auf Ficoll-Plaque geschichtet
- 30 Minuten bei niedriger Umdrehungszahl zentrifugiert
- Buffy coat an der Phasengrenze entnehmen
- Es folgen noch weitere Zentrifugier- und Waschschritte
- Zellpellet in Medium aufnehmen
- Zellsuspension auf Zellkulturplatte überführen und in den Brutschrank stellen
- Regelmäßige mikroskopische Kontrolle
- Weitere Bearbeitung der Kulturplatten: Mediumwechsel, Passage, Ernte
- Nach etwa 4-6 Wochen: Ernte der Zellen
- Bestimmung der Zellzahl, Vitalitätskontrolle, Sterilitätstest
- Lagerung der Zellproben bei -196° C